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產品介紹

蛋白質組學研究材料主要是新鮮的組織、體液或體外培養細胞,因為新鮮標本可以最大限度保存蛋白質的結構完整性,防止蛋白質降解,從而得到完整的蛋白質表達譜。但新鮮標本的采集和保存需要較高的條件和費用,而可靠的生物標志物的發現需要大量的連貫性的樣本,另外醫學發展的趨勢是對疾病的微創傷性進行早期診斷,以新鮮組織為樣本進行大批量系統性的研究變得越來越困難。因此體液曾一度成為蛋白質組學的研究對象。但生物標志物須準確地反映疾病部位的病理變化,而體內微環境極其復雜且處于動態變化中,病變部位的化學信息很難在體液采集的部位達到質譜儀檢測所需濃度,因此,針對體液的蛋白質組學研究很少發現有特異的生物標志物。體外培養細胞由于生長環境的改變,不能完全反映細胞在體內的生物狀態,也不是理想的臨床病理學研究材料。當前世界各大醫院及研究機構都有極其豐富的病變組織檔案庫,即甲醛固定及石蠟包埋的組織庫,這些組織具有病史清楚、診斷明確、臨床資料詳盡等優點,并能長期穩定室溫保存,對疾病的回顧性研究(尤其是罕見病例)具有極高的應用價值,已引起蛋白質組學研究人員的注意,并取得了初步的成果。但是,組織在固定和包埋過程中,蛋白質的結構及理化性質會發生改變,因此,在進行后續的檢測之前,需要對蛋白質進行修復。

甲醛是由37%~40%甲醛10ml和90ml磷酸鹽緩 沖液組成的混合物,甲醛終濃度為3.7%~4.0%。通過對組織進行甲醛固定及石蠟包埋等處理,組織細胞中的蛋白質。核酸和蛋白質一蛋白質之間及其分子內部迅速形成共價交聯。甲醛的這種共價交聯作用,能夠阻止細胞器 和生物大分子的移位,從而保存細胞微細的組織病理學形態,而石蠟包埋使組織可切成微米級薄片,使光鏡觀察組織結構成為可能,并使包埋組織長期室溫儲存,但同時使蛋白質的理化性質發生部分改變,如溶解度明顯下降、胰蛋白酶切位點部分丟失、熱穩定性增高、等電點p H值改變等蛋白質在甲醛中僅2 0 m i n就可形成二聚體、三聚體甚至多聚體,某些抗原決定簇位點被掩蓋。因此,要使甲醛固定的組織適用于蛋白質組學的研究,蛋白質的復性是首要解決的問題。


樣本特點

可以保存組織或細胞固有的物質,能凝固或沉淀細胞內或組織液,糖原等,使組織或細胞基本上保持與生活時的物質一樣,并且可以長期保存。


項目流程




實驗周期

樣本質檢合格后,4-8周。

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